顯微鏡調焦需先用低倍鏡物鏡調焦上下調節聚光鏡
暗場顯微鏡的調節步驟大致如下:
(1)照明光源較好選用弧光燈或點光源。使用其他光
源時，光強要盡可能大一些，因為光線越強，則粒子的散射
光也強，容易看得很清楚。有人認為，暗場顯微術較好在暗
室中進行，這樣則對光源的要求可以低一些。
(2)選好光源后，用明視野聚光鏡按臨界照明法調節
好燈光。
(3)根據需要與可能選用合適的暗場聚光鏡。
(4)要仔細地作好顯微鏡的合軸調整工作。大多數暗
場聚光鏡在其上鏡片上有某種表示中心位置的“記號”。先用
物鏡對此“記號”調焦，然后通過聚光鏡上的定中心螺釘來
調節聚光鏡的中心。當“記號”的像位于視場正中央時，合
軸調節完畢。
(5)根據聚光鏡的要求，選定合適厚度的完好載玻
片，仔細清潔后制作切片。某些聚光鏡上配備有“載玻片厚
度補償裝置”，這時，只要檢驗這一調節裝皿，看其是否與所
用載玻片的厚度相適合。
(6)將聚光鏡的上鏡片滴上油液或水(切勿在其中形
成氣泡)。先用低倍鏡物鏡調焦。上下調節聚光鏡，當載玻片
上被照較明亮的面積是一個直徑較小的光點時，較為適宜。
聚光鏡的調焦比合軸更為重要。因為當稍微偏離準焦位
置時，許多衍射花紋迅速增大，以致產生假像，導致對結構
的錯誤解釋。
（7)換上所需要的物鏡。如果需要，則再作一些細微
的調整。
