DNA電子顯微鏡技術的應用,精細菌體科研光學儀器
DNA的電子顯微鏡觀察
與一般的手段不同，DNA的電子顯微鏡檢查是一種簡
單、迅速而又可靠的技術。由于可以對單個分子進行觀察，
并且所有的分子都可以觀察到，所以，它能很好地補充凝膠
電泳技術的不足。在凝膠電泳中，看到的是長度相同的一群
分子。電鏡除了可用于DNA的一般觀察以外，還可進行異
源雙鏈的檢查，從而確定非同源區的位置。
原理
用水樣法和醋酸鈾染色法觀察DNA。
這是一項非�？焖俚姆椒�，當需要用定性的方法確定
一個DNA樣品的分子大小或結構拓樸學時非常有用。第二部
分將集中討論異源雙鏈的形成以及用甲酰胺法觀察異源雙
鏈。起初，可用噬菌體進行異源雙鏈分析。后來，可以對實
驗過程中產生的缺失進行定位。
實驗步驟
1．演示檢查電子顯微鏡。
2．按照實驗方法二十七，在電鏡下觀察用水樣法制備的
DNA樣品。DNA應事先準備好。
3．按照實驗方法二十八在電鏡下觀察用甲酰胺法制備
的DNA樣品。用于異源雙鏈分析的噬菌體原液應事先準備
好。
4．用較好的銅網樣品，攝下異源雙鏈的圖像。
5．對感興趣的噬菌體進行電子顯微鏡異源雙鏈分析
這是一個可靠的方法，但是需要較長的離心時間。
污染的DNA、RNA和某些蛋白質在16小時之內不會達到平
衡，它們會分布于整個梯度。這種方法的優點是，噬菌體在
一個遠沒有上述方法所用的那樣陡的梯度中即可到達平衡密
度。如果噬菌體制備物是不均一的，即噬菌體含有的DNA
大小不同，結果所觀察到的噬菌體帶就會不只一條。
觀察·個微弱噬菌體帶的較好方法是，用一條來自于顯
微鏡光源的平行光，從離心管的上部照射下來。在離心管的r
背面放一個平的黑色背景也有利于觀察。
