相差以及熒光集一體的光學顯微鏡的應用特點
熒光顯微鏡熒光顯微鏡檢術中另一種類型的可見光顯微鏡檢
術，其應用率正在迅速增長。熒光顯微鏡檢術中，用于照射標本
的光線，為某一種波長的光線。所見到的影像，是一種分子發射
的結果，這種分子可吸收初級激發光線，然后再以射出波長較長、
能量較低的光線。在聚光器下面和物鏡上面各放置適當的濾片，
以保證好象是處于“自身發光的”狀態。次級發射可來自標本中
天然存在的“熒光物”，或來自引入、與標本的某些特殊成分相
結合的熒光染料，或者來自與特異抗體相連結的熒光染料，由于
熒光影像所固有的高度反差和特異性，因此，熒光顯微鏡技術是
將來大有前途和十分重要的一種顯微技術。
相差顯微鏡相差顯微鏡是一種很重要的光學設計，它可把肉
眼不能觀察的折射率的微小差異，轉換成可以看到的強度差異。
因此相差顯微鏡可觀察活細胞的某些成分，而在通常情況下，
這些成分只有在已死的染色標本上才能看到（圖1-7 ），光學顯
微鏡的影像平面內，來自相當于帶有志其四周不同折射指數的標
本透明區域的光線，是處于周圍介質光線的相位之外，但是，通
常的光學顯微鏡對這些相位差異并不敏感，所以，在這些各部結
構之間不顯示強度差異，因而沒有反差。相差顯微鏡配備有特殊
光欄、吸收板和相位轉換板，這些裝置可用來：（1 ）部分地區
分背景照明光線和來自小的透明標本微細結構的、在寬角上分散
繞射的光線；以及
（2 ）通過在影像平面上光線的相互作用這種方式，轉換這
兩種光線成分的相位和強度，從而在原先只存在相位差異的部位，
產生強度差異和反差。
相差顯微鏡的幾個主要缺點為：（1 ）由于不能完全區分背
景光線和繞射光線，其影像周圍可出現暈；（2 ）吸是來自小的
物體或來自邊緣部分的、快速變換的延遲的相位差異。
