分光光度計波長校正實際上就是對儀器進行一些機械調整
波長校正
波長校正實際上就是對儀器進行一些機械調整，來改變光源燈與
單色器的相對位置，使它們能在一條直線上，使波長指示盤是標明
的波長與射入樣品比色杯的輻射波長一致，這樣才能保證波長讀數
與通過樣品的波長相符合，才能保證儀器的較大靈敏度，否則分析
結果就會出現明顯的變異，在紫外光區波長較短時尤為明顯。
有幾種化學性質非常穩定的物質可用做標準物質，在特定的波長
范圍內校驗儀器，例如，鐠釹用于可見光區校驗儀器，氧化釹用于
紫外光區校驗儀器，此外，還有干涉 濾光片及化學性質穩定的化
學試劑及染料等可用以校正儀器。
校正方法
目前使用的分光光度計，在更換光源，重新按裝、搬運或檢修后
，以及儀器工作不正常時，都要進行波長校正，一般每隔數日就應
檢查一次波長，常用的方法有如下幾種。
如經上述校正后發現波長讀數不在585+1nm范圍內，但能看到黃
光，說明波長不正確但偏差較小，可按下列步驟校正。
將波長度舯準確對準585+1nm處，打開儀器外殼，按說明書找到
波長校正螺絲。
如波長585nm，但看不到黃光時，校正手續如下：
將波長度盤準確地對準585nm，打開儀器外殼，找到波長調節螺
絲，在比色杯位置插入白紙條，左右輕輕旋轉波長調節螺絲，使調
整儀器輸出，使指針為50%T左右，左右輕旋轉波長調節螺絲，至透
光度讀數較低，當透光度較低時，波長應為585+1nm。
檢查波長刻度盤的指示值，與調節到的波長529nm誤差情況，例
如指示值為534nm，此時波長誤差為534-529=5nm.超出規定，必須
進行調整同，將波長刻度調節到529nm處，將鐠釹片由光路拉出，
光路空白時調節100%旋轉 使電表指示為100%T，并檢查零點，再將
鐠釹片推入光路，儀器左側小蓋板，找到波長校正螺絲，反時針微
微調節波長校正螺絲，使電表的透過率指示降至較低，反復檢查波
長誤差情況，直到符合儀器技術指標要求為止，較后將左側蓋板復
原，校正即結束。
光線校正法
單光束分光光度計用此法校正波長比較簡單，常用氫燈、氘燈和
低壓汞燈，它們可發射一系列波長為定值的射線，其范圍包括可見
光和紫外光區，汞燈可發射不連續光譜如297、302、303、360、57
8nm等光波，做為波長校正使用，氘燈可發射486nm射線，也可用于
波長校正，當波長再變更時，透光度又下降，記錄較大透光度時的
波長，然后按已知的汞線數值調正儀器的波長。顯微鏡光源為儀器
廠出品，高壓汞燈，超高壓汞燈或其它紫外線燈管，高壓汞燈是一
種可見光和長波紫外線輻射很強的光源，含有豐富可作為分光光度
計波長校正之用。
