細胞測量應取視野既有清晰的結構-顯微鏡常識
如果目的是對各種細胞器進行測量,則用電子顯微鏡在10,000倍
左右拍照,再放大3倍左右。應使所取視野既有清晰的結構,又
有代表性。這里要注意,不必要拍攝完整的細胞截面,只要所取
的細胞質范圍較大就可以。拍攝的范圍越小,照片之間的差異越
大,就需要多拍些照片。
如果細胞器分布有極性,則在較低的倍數拍攝完整的細胞截
面,將細胞質分區,求出各區相對于整個細胞質的體密度。同時
在較高的倍數拍攝所研究的區域,以該區域為參照系,求出其中
各種結構的體密度。結構在各區域中的體密度乘以該區域在細胞
質中的體密度,乘積之和為該結構在整個細胞質中的體密度。
如果目的是分析某種細胞器內的結構,則可以在20,000倍
以上,專門拍攝這種細胞器,還可以再經光學放大,使其內部結
構清晰,便于測量。
這里還要注意電子顯微鏡放大倍數的重復性。隨著操作電子顯微鏡方法的
不同,雖然電子顯微鏡.上顯示同樣的放大倍數,而實際的放大倍數卻并
不一樣。在操作中影響實際放大倍數的主要因素有:透鏡電流的
穩定性,樣品的位置及透鏡的磁滯現象。在電子顯微鏡開機之初,透鏡
勵磁線圈溫度尚不穩定,因而電流不穩,放大倍數也不穩。