圖像熒光顯微鏡的原理,適合微生物細胞分析研究

熒光顯微鏡

    熒光顯微鏡可用來估算微生物群體密度和生存能力，其原理為：
某些分子能吸收特定波長的光，并釋放出不同波長的光（即熒光），
能夠在熒光顯微鏡下被觀察到。

    自然界有些物質（如葉綠素）能夠產生熒光，人工合成的某些物
質（如熒光團）也能產生熒光。熒光基團吸收藍色光形成激發態，激
發態電子迅速釋放出多余的能量而返回到基態。

    當電子釋放能量回到基態時，釋放出的綠色光能量較低，且波長
較藍色光長。

    然而，有些熒光基團能吸收綠色光而激發出能量更低、波長更長
的紅色光。

    在熒光顯微技術中，特定的染色劑被細胞直接吸收，或者與細胞
中的有機物發生化學反應，或者被特定的亞細胞器富集。免疫化學技
術也經常被應用于熒光顯微技術，

    因為熒光染料可以與活細胞膜中某些部位發生特異反應，所以利
用熒光顯微鏡技術可以區分活細胞與死細胞。“存活但無法培養（VBNC）”
的細胞在標準微生物培養基上無法生長，可用熒光顯微技術進行觀察。