多功能相襯熒光顯微鏡的應用-細胞研究光學儀器
應用暗視野或相襯顯微鏡可看到活的未染色的微生物。暗視野顯微
鏡中有一個暗視野擋光板(環形光欄),聚光器只能把中空的光錐匯聚
到樣本上,使得僅被樣本反射或散射的光線才能進人目鏡,使得微生物
樣本就像反襯在黑暗背景上的明亮物體,但無法看清楚其內部結構細節。
相襯顯微鏡的聚光器通常也用一個環孔擋板產生有一定角度的斜光,
當斜光匯聚到樣本平臺,通過細胞的部分光線被折射,而匯聚成像
;而未折射的光進人鏡筒后使其匯聚在預設相位板的特定區造成相位移
動;從而使得折射的光與未折射的光之間存在位相差(光程差),由于
光的衍射與干涉效應從目鏡看去樣品就與背景反差加大。相襯顯微鏡下
細胞的各種結構細節可由不同亮(暗)度表現出來,
在熒光顯微鏡中,生物樣品用一種熒光物質直接或間接(如通過抗
體)附著,熒光物質吸收紫外線(激發光)后發出可見光,所發光的顏
色與所采用的熒光物質有關;如熒光素吸收495 nm波長的紫外線后發出
黃綠色(波長525nm )的可見光線。此技術采用紫外光源(如汞弧燈等),
并有濾光片系統,可使紫外光投射在樣品上,但僅熒光或可見光可
進人目鏡而被觀察到。
應用熒光顯微鏡除可研究被熒光染色的成分分布外也可直接觀察生
物樣品中天然熒光物質(如葉綠素)。