熒光顯微鏡的構造與一般光鏡有何不同及其應用
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡的使用為病害的診斷和微生物的鑒定開辟了新的途徑,簡化
并加快了診斷步驟,特別是在利用熒光抗體后,更加改進了診斷技術。
熒光現象光是有一定能量的電磁波,它可以影響所照射到的分子中的電
子活動。分子中的電子如果不是很牢固的,在光波振動的影響下,可以開始
發生運動,離開它原來運動的軌道.與照射的光波的振動發生共振。
電子的振動需要能量,這是由照射的光線供給的。我們說分子吸收光,就是
發生這樣的作用。
熒光顯微鏡的構造熒光顯微鏡的結構與一般明視野顯微鏡相同,主要的區別
有以下三個方面:
①光源不同一般是用汞弧光燈的光波,非但光度強.而且更主要的是能產生
足夠的短波光,效果比一般白熾燈好。汞弧光燈的光波,在紫外線部分是20
0^-400nm.可見光部分是400-780nm,紅外線部分大于780nm。這種燈要用較
高的電壓(達18000V ),并且價格也較貴。
②暗視野聚光鏡為了便于看清熒光,一般都是用暗視野聚光鏡.弱的熒光用
明視野聚光鏡是不容易看清的。暗視野聚光鏡帶來的另一個有利情況,就是
大部分紫外線都被這種聚光鏡偏轉掉,可以保護工作者的眼睛。為了充分發
揮保護作用,所用的物鏡的數值口徑一般都要比聚光鏡的數值口徑小0.05.
③濾光片調節光波水銀弧光燈產生溫度很高的紅外線和對人眼有害的紫外線
,一般用三個濾光片解決:①隔熱濾光片,放在光源與聚光鏡之間,消除紅
外線。紅外線產生熱,并且與熒光的產生無關。
②激發光濾光片,放在聚光鏡的下面,能夠激發玻片上熒光物產生熒光的短
光波通過,而其余的光波都吸收。這種濾光片顏色很深,設計時只使綠光、
藍光、紫光和紫外線通過。
③屏障濾光片,放在顯微鏡的物鏡和目鏡之間,除去殘余的激發短光波,只
有熒光被看到。屏障濾光片的設計要準確,只能除去較短的激發光波,對波
長較長的熒光沒有影響。