光學顯微鏡的物鏡和目鏡具有什么樣特點
熒光顯微鏡的物鏡和目鏡具有什么樣特點
物鏡
一般中等能力以下的千物鏡適用于暗場照明,油浸物鏡(數值孔
徑大于0.95)一般不適于暗場照明,因為這些物鏡仍然能夠收集從聚
光器照明光錐來的光,并表現為雜激發光。然而,在表面照明時,樣
品照明和熒光收集均由物鏡單獨完成。
因為樣品照明和熒光收集與物鏡的NA的平方成比例,因此,采用
表面照明的熒光顯微鏡檢術的效率依賴于所用物鏡NA的四次方。由此
可見,要研制倍率中等而NA較大的專用物鏡作表面照明。
浸沒式物鏡比千物鏡更適宜作表面照明,因為從玻璃一空氣界面
反射的入射光的量遠比從玻璃一油(甘油或水)界面的量多。
目鏡
如果顯微鏡制品中的熒光物體必須定位并把它對在測量光闌中央,
顯然有衰減的危險。為了減少這種危險性,應把激發光的強度降低到
使熒光物體正好可見得能夠引進測量視野。因為單位面積的顯微鏡制
品的亮度隨目鏡倍率的平方減少,因而常用低倍目鏡
因為NA高的物鏡有較大的放大倍率,所以,把低倍目鏡與這種物
鏡結合使用常是得到總倍率適度而熒光收集能力又高時所不可少的。
應該了解在測微熒光術中極有效地收集熒光常比使用很強的激發
光更好,因為后者往往會引起FRP 的迅速衰減。