不同類型的熒光顯微鏡都有哪些特點和應用
現今市面上有兩種類型熒光顯微鏡可供我們選擇使用:一種為透
光型熒光顯微鏡(transmitted -light fluores- cence microscope),
一種為表面熒光顯微鏡(incident-light fluorescence microscope
又名epif luo- rescence microscope )。
透光型熒光顯微鏡的激發光和熒光都需要經過標本,故此部分光
源會被標本吸收掉,因此熒光一般都比較弱。但是表面熒光顯微鏡的
激發光是由上而下地打在標本的表面(光被吸收就少),故此熒光較
強。所以現時大多數供研究用的熒光顯微鏡都為表面熒光顯微鏡。
熒光為可見光,同時具有專一性。譬如免疫熒光技術中常用的FITC
熒光染料〔較適激發光為藍光(即450-500 nm)〕只散發出黃綠色熒
光(500 ——550nm )。因此如要得到專一的熒光,就得讓它再經過
一塊濾光片,叫做吸收或阻擋濾光片。這一塊濾光片有兩種作用:
1.它能將激發光源吸收掉,使它不能進入目鏡,
2.它能有選擇性地讓某一些熒光(光波段)通過,而把其它的非
專一性的可見光擋住不讓通過。由于激發光源可以用紫外光也可以用
其它的短光波,而熒光又是多樣的,所以激發光濾光片和吸收
濾光片有好多種可供選擇配套。這需要參考制造顯微鏡的廠家提
供的資料,來決定所需要的組合。