顯微鏡的成象質量與蓋玻片和載物片參數的關系
顯微鏡的高質量成象及其極限分辨能力在很大程度上與這樣的輔
助材料有關:如蓋玻片,載物片和浸油等。這些材料不滿足一定的要
求,通常就會使較完善的顯微鏡喪失其優越性。
蓋玻片顯微鏡物鏡是對一定厚度蓋玻片設計的。對于在透射光中
研究的生物體,蓋玻片厚度取0.17毫米。
對于紫外光譜區的物鏡采用厚度為0.3 毫米的石英蓋玻片。
通常,在投射光中工作時采用無蓋玻片(d=0 )的物鏡。
數值孔徑0.25~0.3以下的物鏡對于蓋玻片厚度在0~ 0.2毫米范圍
內改變時并不靈敏。這樣的物鏡刻有“-”號,也就是它們既可用于
無蓋玻片,也可用于物體的保護性蓋玻片。蓋玻片直接放在標本上,
而在校正物鏡時是假定物點與蓋玻片的下平面相重合。
根據計算和實踐可以確定,在蓋玻片名義厚度有極微量的偏離時,
強光力非浸液物鏡就會降低成象質量。這樣,數值孔徑為0.65的物鏡
在蓋玻片厚度偏離名義值△d=0.015 毫米時,象質明顯惡化,而對于
物鏡A=0.85,則在△d=0.004 毫米及物鏡A=0.95,則在△d=0.002 毫
米時象質明顯惡化。
浸液物鏡容許有較大的蓋玻片厚度偏差,但對于蓋玻片的折射率
只容許較小的偏差,例如,對于數值孔徑為1.2 、2.3 和1.4 的浸油
物鏡,△nD相應為0.003 、0.001 和0.0007. 。
因而,在使用強光力非浸液物鏡時,對蓋玻片厚度的公差是非常
嚴格的。