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相襯顯微鏡能觀測透明的樣品標本的光學原理




來源:yiyi
時間:2014-3-14 21:46:39

透明的樣品標本適合使用相襯顯微鏡的原理

    相差顯微術

    一般顯微鏡之所以能看見樣品的細節,是因為物體上反射出來的
光線的波長(顏色)和振幅(亮度,包括它本身各部分細節與細節周
圍不同物質對光的吸收或反射程度)不同造成明暗的對比而形成的。

    而觀察無色透明的物體及其細節則較困難了,因為細節與背景一
樣亮。

    一般是對物體進行染色后再觀察。
    但是有些樣品一經染色就容易變形,甚至導致活體樣品的死亡。

    通過加強明暗對比(或將聚光鏡遮掉一部分,造成偏斜照明),
雖可看到物體但不能充分利用物鏡的數值孔徑,分辨率低,且亮度大
減。
    利用暗視野照明,雖可看到物體表面的反射光,但看不見內部細
節及結構,


    利用熒光顯微術可以看到活體,但只限于能發射熒光的物體。

    在這種情況下,可用相差/相襯顯微鏡來有效地觀察透明無色的標本
(細菌、細胞等生物活體),甚至還可以根據觀察者的目的及標本的
光學厚度來選擇合適的反差。這是相差顯微術的突出特點。

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