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真菌標本制作及檢測光學顯微鏡的實驗方法




來源:yiyi
時間:2014-2-24 19:03:11

真菌標本制作檢測光學顯微鏡的實驗方法

幾種真菌標本的顯微鏡檢查方法

材料的處理
    1。組織的整體檢查切取小塊受病組織或寄主組織薄片,用低
顯微鏡觀察組織表面的病菌。這樣可以看見病菌自然著生的狀態。若
能用聚集的強光照在標本表面,可以看得更清楚。有些時候也可剝
取表皮鏡檢。

    2.組織進明后整體檢查為了觀察組織內部的病菌,可以將組
織透明后作整體檢查。透明的方法很多,可以根據不同的材料從
有關書籍上查到不同的方法來試驗。這里僅舉常用的水合氯醛透明
法。將小塊葉片在95%的酒精與等量的冰醋酸棍合液中固定24小
時,然后浸在飽和的水合氯醛的水溶液中(水合氯醛5克,水2毫升),
待組織透明后,取出用水洗凈,經稀苯胺藍的水溶液染色后,用
甘油封蓋。

    水合氯醛透明法亦可用于枯葉表面和內部越冬的病菌。
方法是將枯葉在水合氯醛飽和液中浸遺過夜(到透明為止),
用清水漂洗數次,然后在10%的氫氧化鉀水溶液中浸數日,以漂去
枯葉的揭色。

清水漂洗數次后,移置于95%的酒精中洗兩次,在無水酒精中浸
三小時(酒精要更換)除去水分,用苯酚松節油混合液(熔化的結晶
苯酚40毫升與60毫升松節油混合)透明,再經二甲苯洗過后,用
加拿大樹膠封固。不作永久封固保存的,亦可于透明后直接顯微鏡鏡檢。

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