顯微分光光度計的組成和應用范圍-樣品微細結構
顯微分光光度計(Microspectrophotometer)是一種自
動化、靈敏度高的多用途微量分析儀,是由計算機調控的儀
器。常用來分析生物樣品微細結構中的化學成分,并可以定
位和定量
分光光度計用的是單色光,使測量光束通過生物樣品的
微小區域(幾個微米)來進行分光光度分析,可用紫外線.
也可用可見光。
此種儀器包括光源、單色器、顯微鏡和光電組合器件四
大部分。
顯微分光光度術是顯微鏡技術和分光光度技術兩者的結
合,是定量的顯微技術,可測出細胞內各種成分的微含量。
如測定DNA, RNA,蛋白質、酶、脂類和酷類以及植物葉綠
素的含量等,已成為組織化學、細胞化學、病理學、免疫學
和藥物學等學科的重要研究工具。
光源:要求電壓、電流和外界溫度均為穩定的,
否則會影響到光源不穩,造成測量誤差。光源分兩種即連續
光源和線光源。
連續光源:為白光源.能在很寬的波長范圍內連續發出輻射。
碘鎢燈:可用作可見光和近紅外光范圍內的光源、
其連續光譜在320~ 3200nm之間。碘鎢燈是在鎢燈中充
以碘氣,以增大發光強度,延長壽命。
顯微鏡:高質量的顯微鏡,具有消色差的物鏡和消色差
與球差的聚光鏡,以及可調的孔徑光欄。
雖然增加高壓會提高光電倍增管的靈敏度但不能無限地
增高,因電壓過高會增加暗電流而使測量結果不準確。用強
光照射會增加暗電流也會使光電倍增管的靈敏度下降,測量
結果也不會準確。