光學顯微鏡直接檢測土壤顆粒微生物細胞的含量
光學顯微鏡直接檢測土壤顆粒法
此法可用于觀察微生物細胞在土壤的有機或無機顆粒上的排列狀況,特別適宜于觀察個體較小的微生物體。
用染色液染色,在鏡檢時可以使微生物細胞與其背景(土壤顆粒)形成很好的對比,視野清晰可辨。
便于分辨活細胞與死細胞。因為死細胞缺乏細胞質膜,染色液易浸入其內,
故在紫外光下染色后的死細胞呈紅色;相比之下,染色液則較難以浸人活細胞體內,故它們常呈綠色。然而,染色液的濃度、微生物細胞的本身性質及其活力都會影響染色的效果和色澤,所以,在實際應用中還需加以注意。
將染色后的土壤顆粒小心地轉移至特制載玻片的水滴中。該特制玻片系由一層無色水瓊脂所孤蓋。瓊脂厚度要超過較大顆粒的直徑,以致在用蓋玻片將顆粒壓入瓊脂時.這些顆粒的上表面大約都在同一焦距平面上,便于顯微鏡物鏡100倍油鏡下觀察。如果載玻片不用瓊脂覆蓋,
則僅有一部分顆粒處于焦點。此外,用清漆將蓋玻片封閉在載玻片上,以防止觀察時樣品水分的燕發。由此制得的帶有染色顆粒的載玻片即可進行鏡檢。
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