細菌的吸光值測試實驗簡介-抑菌試驗檢測顯微鏡
細菌培養
將沙門氏菌(Salmonella enterica)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、腸炎弧
菌(Vibrio parahaemolyticus)分別加入不同容器之 LB(Difco LB Broth,Miller
(Luria-Bertan))培養液中(腸炎弧菌(Vibrio parahaemolyticus)以加入 2%NaCl 之 LB
培養液中培養),于 37℃、160rpm 之培養箱培養四至六小時,得含菌培養液。
五種食材萃取液的抑菌測試
(一)抑菌圈試驗
于無菌操作臺上,取出培養好之沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、腸炎弧菌,用無菌棉
棒沾取三種含菌培養液,先橫向、后直向地均勻涂抹于培養基上。
接著將鑷子沾酒精后以火烤消毒,再用鑷子夾取環狀紙錠(paper disc)充分浸濕
于蒜、芥末醬、姜、蔥、辣椒之萃取液及無菌食鹽水,每次夾取都需重復鑷子消毒之動
作;再分別置于三片各涂好沙門氏菌、腸炎弧菌、金黃色葡萄球菌的培養基上,并用簽
字筆于培養皿底標出萃取液種類。
較后將平板倒放于 37℃培養箱中培養一個晚上,隔天以直尺測量各萃取液于三培
養基上,環狀紙錠四周之抑菌圈直徑大小,以㎝為單位,并紀錄之。
(二)吸光值測驗
以每瓶 19ml 分裝未高溫滅菌之 LB 培養液,未加入 2% NaCl 12 瓶,已加 2% NaCl
6 瓶;以高壓蒸氣滅菌之(121℃,1.1 公斤/平方公分)。接著將三菌加入菌液中,沙門
氏桿菌與金黃色葡萄球分別各加入 6 瓶未加入 2% NaCl 之培養液,而腸炎弧菌則加入已
加 2% NaCl 的 6 瓶培養液中,并分別用簽字筆標示菌種,后于 37℃、160rpm 之培養箱
培養 5 小時。
于培養好的三種菌液(各 6 瓶)中,分別將蒜、蔥、姜、辣椒、芥末醬之萃取液及
無菌食鹽水加于 6 瓶菌液中,一瓶一種各 1ml;混合后以定時器計時 0 min 與 60 min 兩
個時間點。