骨頭或者牙齒怎樣制作用于顯微鏡觀察的切片
骨頭 & 牙齒染色法
骨頭 & 牙齒為動物體內較堅硬之組織，欲制成切片有二種方法，其
【回染色法】一為利用脫鈣液 溶解其堅硬之鈣質使組織軟化，即可制作切片。
另法用鋸子將組織鋸成0.2 ~ 0.3㎝厚度，再用磨石磨成100μ~ 150
μ之厚度后加以染色及封蓋。
第一法：切片法
使用脫鈣完畢之組織材料，移入內中和一天，經流水洗之，
后依脫水法，包埋法，制作8μ~ 15μ左右之切片。用染色法，
染色程序依染色法，其他采用及均可。
第二法：手工研磨法
骨頭 & 牙齒于流水中洗凈，放進Acetone內脫取脂肪約一星
期后以流水洗一天，續于20 %漂白劑中漂白一星期，用流水
洗一天，于日光下曬干。用鋸子將組織鋸成0.2 ~ 0.3㎝厚度，
用手指壓住于磨石上推磨成100μ~ 150μ之厚度，再以細磨石
加Glycerin磨至表面光滑，于流水中洗，再經95 % Alcohol浸透
一天，放于室內干燥后以Balsam封蓋之。
第三法：薄片封蓋法
以手工推磨而成之薄片的封蓋，是Balsam只黏貼于薄片周圍
而不滲透于薄片組織內，因Balsam如滲透入組織細胞內，組
織細胞之輪廓被透明化無法觀察，是故，Balsam須以酒精燈
煮沸濃縮，但切忌過渡免生氣泡，將剛煮沸過之Balsam滴于
組織上，Cover Glass封蓋后用手輕壓，隨即放入冷水內使其迅
速凝固，Cover Glass須以圓形為主，后Cover Glass周圍以未稀
釋之油漆加以封之。
諸須先以Trichloressigsaure 10 % 之Formalin 10 %混合液脫鈣處
理，后以一般正常切片法包埋制作。H-E 染色即可。
可觀察細胞形狀、骨小板、股板層、Horris管、 Volkman管、
骨小洞、骨小管等。
第四法：手工磨成薄片染色法
(1)?薄片放進1 % NaOH 24 ~ 48 hrs.，薄片放置時勿重疊。
(2)?Distilled Water洗10 mins.。
(3)?1 % AgNO3 24 hrs.。
(4)?Distilled Water洗10 mins.。
(5)?中性1 % Formalin還原24 hrs.，此時薄片成黑色。
(6)?黑色薄片以流水洗30 mins.。
(7)?于室內或38℃恒溫箱內干燥之。
(8)?用細磨石加輕磨薄片兩面使黑色成淡黑色。
(9)?移入流水洗1 hr.，經95 % ~100 % Alcohol脫水。
(10)?用Xylene透明，濃縮之Balsam封蓋。
染色結果 骨小洞、骨小管與其他組織均呈鮮明黑色。
如欲觀察Harris管以煮之染色可得極鮮艷之染色效果。
