動物細胞切片染色制程實驗檢測顯微鏡
單純脂肪染色之要點
1、固定液
較好之固定液為中性福馬林緩沖溶液或Formol-Calcium。
醇與一些有機溶劑,由于會抽出油脂而不可使用。
Mercuric Chloride固定液會使組織硬化而不利于切片。
以含Picric Acid固定液固定時,不易被冷凍而使冷凍切
片產生困難。
2、處理與切片
顯示是否有單純脂肪存在之單純脂肪染色法,通常使
用冷凍切片操作。一般洏言,浮游切片之染色比固
定于玻片上要來得快。
3、染色
某些單純脂肪染料之溶劑可供使用,如70 % Alcohol、
Acetone-Alcohol混合液、異丙醇與Propyleneglycol。染料
之溶劑必須不可使組織之溶出。異丙醇會稍為抽出組織
油脂,但Propylene Glycol則否。
染色時須于密閉溶器內進行,以免溶劑爭發而使染料沉淀于組織上。
4、固封
固封時,通常使用水性固封劑,如甘油明膠(Glycerol
Gelatin or Glycerin Jelly)。
若使`用含溶劑之固封劑,則會使油脂溶解。若固封后,
切片內含有氣泡,不可加以擠壓,因其可能將已染色之
油脂壓出。此時將切片置于熱水中至蓋玻片脫落為止,
后再加以固封。甘油明膠于室溫時為固體,但加威時不可過熱。
Kaiser’s甘油明膠之配方Gelatin 10.0 gm
Distilled water 52.5 mlGlycerin 62.5 ml
酚結晶 1.25 ml
混合后以褐色瓶保存之