無菌操作實驗稀釋及滴定計數-細胞研究顯微鏡

無菌操作連續稀釋及滴定計數
一、目的：利用稀釋后的菌液滴定至培養基進行培養，之后計數其生菌數。
 三、原理：從高濃度稀釋至低濃度，可藉由滴定后的菌落數，計算出菌的濃度及數量。
 四、材料： 
1.無菌培養皿   2.稀釋液 3.振蕩器       4.無菌操作臺 5.NA agaer     6. 恒溫培養箱
 7.E.coli 菌液    8.安全吸球 9.移液管      10.酒精燈 11.95%酒精    12.打火機  13.簽字筆   
 14.試管 四、方法： 1. 10 倍連續稀釋：
取0.5ml 樣品+4.5ml 稀釋液(0.85%NaCl+0.1%agar)→混合均勻(振蕩)→共6管
2.滴定計數法(Drop method)：取50μl 適當稀釋倍數之稀釋液→滴入四區域之agar plate→
滴干后37℃培養→計數(隔天中午前觀察) 3. 樣品原液：E.coli，求得菌濃度

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