光學顯微鏡有景深對于CCD 影像 z 軸拍攝清晰度的影像
CCD 影像的 z 軸間距與顯微物鏡之聚焦深度的關系一般光學顯微鏡有景深(Depth of Field)的緣故,
顯微物鏡的聚焦深度(Depth of Focus)為 3.5 微米,亦即待測物在景深
范圍內,CCD 攝影機皆能擷取到聚焦清晰的影像。
所用到的聚焦度計量法則,主要是根據 CCD 攝影機所擷取影像中的像素
灰階值變化劇烈的程度,來判別是否在焦平面上,所以若影像的 z 軸
間距小于景深,對同一 CCD 像素而言,在景深范圍內的灰階強度值
較無劇烈的變化,導致重建出來的結果較差;
若影像的 z 軸間距大于景深,即我們不是以上下間隔 3.5 微米的影像,來求得每層影像中的
焦平面區域,而是以上下間隔 7 微米的影像,來推得每層影像中焦平
面的區域,重建出來的結果,CCD 重複擷取影像 90 張再取其平均值,影像張數共 23 張,
重建的演算法則為較小相鄰反捲積。
可以察知當影像間距大于景深時,雖然影像中灰階強度劇烈地變化,但相對地 z
軸解析度就不好,當然重建出來的待測物三維表面結果,其整體解析度就較差,
顯微物鏡的規格,來決定影像間的 z 軸間距,故本文第四章節所重建的結果,其影像間的 z 軸間距
大小為顯微鏡物鏡焦深 3.5 微米,使得 CCD 在擷取影像過程中,能同
時兼顧到影像中灰階強度變化的程度與 z 軸解析度