折射儀用于制備過程中測定離心介質折光系數
分離細胞勻漿物中的細胞器所需要的設備包括一個有相容的轉頭的低速和高速或超速離心機,
折光儀以在制備過程中測定離心介質的折光系數,一個梯度形成裝置和梯度收集裝置。經常使用的轉頭在三種普通的離心機中有:垂直(或接近垂直)、固定角和吊桶式一對于固定角和垂直轉頭,離心管中的溶液方向在加速時是從水平到垂直,而在減速時相反。這些轉頭在密度梯度離心中特別有用,因為在短的路徑中很快達到了平衡。對于吊桶式轉頭,裝有溶液的離心管在加速過程中從乖直變到水平方向.在減速結束后又反過來、這樣沉淀物傾向于集中在靠近管壁的周圍。
通常說來,細胞勻漿物分步分離的第一步是差速離心,在一系列離心過程中離心力越來越大。典型的差速離心順序。依次差速離心得到的沉淀再進行超速離心。這種逐漸加大離心力的順序離心的過程將根據細胞成分的大小和密度來實現分離。通常用一個密度梯度,常常是一個較窄的蔗糖梯度來分離細胞成分.
每種成分與其他成分分離的速度是它的大小和形狀的函數,稱為沉降系數。不同細胞器的大小和沉降特性列于下表中
細胞器的大小和沉降特性
圖1
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