凝膠電泳在生物分析裏常常會遇到一個問題,要如何分離不同的DNA、RNA或蛋白質呢?目前較常用來分離DNA、RNA或蛋白質的方法稱為“凝膠電泳”,其中PFGE凝膠電泳可以用來分離DNA或RNA;SDS-PFGE凝膠電泳可以用來分離蛋白質。
PFGE凝膠電泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis)由于DNA或RNA含有磷酸根,所以帶負電荷,而且帶電量固定,當我們外加電場,可以使DNA或RNA片段沿著電場的方向由左向右前進
,凝膠為多孔性物質,DNA或RNA在凝膠中的移動速度與分子大小成正比:
>DNA或RNA愈短,分子量愈小,質量愈輕,移動速度較快。
>DNA或RNA愈長,分子量愈大,質量愈重,移動速度較慢。
科學家將螢光劑與DNA或RNA結合,在紫外光照射時會發出很強的螢光,所以可以明顯分辨出不同大小的DNA片段,較后可以在凝膠不同的位置上看到發光的條紋,結果只知道DNA片段共有6種不同的長度,卻不知道這6種DNA片段的A、T、G、C如何排列組合。
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