快速學會使用熒光顯微鏡的方法-上海光學儀器廠

快速學會使用熒光顯微鏡的方法

有的朋友在使用熒光顯微鏡時候，由于沒有弄懂原理，就盲目的去試驗，較后找不到問題出在哪里因而變得沮喪，所以我在這里給大家講一下原理，以后大家遇到熒光顯微鏡的問題就可以觸類旁通了

先了解一下熒光的原理和性質，然后才能確認一下要使用的激發塊的類型。
1、熒光原理是用短波長的光去激發標本，標本產生長波長的熒光。在光譜上，345nm是近紫外光（肉眼看不見），461nm是藍色光，530nm是綠色光。

2、你染細胞核的DAPI染料應該用激發波長359nm的近紫外光去激發，選擇吸收波長461nm的濾色鏡去觀察藍色熒光。

3、你染細胞質的綠色染料應該用激發波長345nm的近紫外光去激發，選擇吸收波長530nm的濾色鏡去觀察綠色熒光。

4、你需要確認一下你所使用的熒光激發塊，一般熒光激發塊有窄帶和寬帶兩種。
1）如果你使用的近紫外激發塊是寬帶的，你在顯微鏡下應該可以同時看到藍色的細胞核和綠色的細胞質！如果只有綠色細胞質，可能是你的激發塊選錯了，你可能選擇了藍光激發，所以只能看見綠色的細胞質。
2）如果你使用的近紫外激發塊是窄帶的，則你將只能看到藍色或綠色中的一種，看你選什么波長激發了。

解決顯微鏡放大400倍才能發現細胞污染問題

那種做布朗運動的小黑點是產堿桿菌，感染后致細胞生長緩慢。一般在實驗條件不嚴格的情況下，培養的細菌都會感染，在高倍顯微鏡下可見。其實在低倍下盯著細胞之間培基看也能看見小黑點。

其實在100×的倍數（甚至相差顯微鏡觀察40×）下就可以發現了，特別是在姨酶消化后，感覺和細胞混雜在一塊，特別臟，現在拿他們也沒有辦法了，

總結了兩點：
1）有條件的把細胞扔掉，但不排除重新購買的細胞仍然有；還有就是沒條件的不要管它，
2）我覺得一般的實驗所收影響不是很大。據說用四環素可以殺滅焦蟲

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